Em geral, o acúmulo de exopolissacarídeos (EPS) produzidos pelos microrganismos ocorre na presença de excesso de substrato e condições limitantes de elementos essenciais ao crescimento, como nitrogênio, fósforo, enxofre, ou magnésio. A presença de EPS associada com células bacterianas é reconhecida em meio sólido para a formação de colônias mucoides e no meio líquido pelo aumento da viscosidade. Este trabalho propõe um método alternativo para realizar triagem de bactérias láticas produtoras de EPS utilizando meio sólido contendo discos de papel de filtro impregnado pela cultura. A seleção foi realizada em diferentes condições de cultivo, variando o tipo de açúcar, pH e temperatura. A produção de EPS foi visualizada pela presença da colônia mucoide sobre os discos, que foram confirmadas pelo precipitado, quando parte desta colônia foi misturada com álcool absoluto. As condições de cultivo em que houve maior produção de EPS foram: sacarose 10%, pH 7,5 a 28 ºC. Este método provou ser eficaz e econômico, uma vez que várias cepas podem ser testadas na mesma placa, sendo possível realizar uma prévia confirmação da produção do EPS.

The accumulation of exopolysaccharides (EPS) produced by microorganisms occurs in the presence of excess substrate and limiting conditions of elements that are essential to growth, such as nitrogen, phosphorus, sulfur, and magnesium. The presence of EPS produced by bacterial cells contributes to slime colonies formation in solid medium and increased viscosity in liquid medium. This paper proposes an alternative method for screening EPS-producing lactic acid bacteria using solid medium-containing discs of filter paper that are saturated with active cultures. The screening was carried out under different culture conditions varying the type of sugar, pH, and temperature. EPS production was visualized by the presence of mucoid colonies on the discs, which was confirmed by the formation of a precipitate when part of this colony was mixed with absolute alcohol. The established conditions for obtaining a high number of isolates producing EPS were 10% sucrose, pH 7.5 and 28 ºC. This method proved to be effective and economical because several strains could be tested on the same plate, with immediate confirmation.

O presente trabalho visou verificar a influência do pH e temperatura na lise de leveduras utilizando planejamento experimental. No estudo, foi utilizado o extrato enzimático, contendo β-1,3-glucanase e quitinase líticas, obtidas do micro-organismo Moniliophthora perniciosa. O delineamento experimental mostrou que as melhores condições para a lise de Pseudozyma sp. (CCMB 306) e Pseudozyma sp. (CCMB 300), pelas enzimas líticas, foram pH 4,9 a 37 ºC, pH 3,9 a 26,7 ºC, respectivamente. As enzimas líticas podem ser utilizadas para a obtenção de vários produtos biotecnológicos a partir de leveduras.

This study aimed to verify the influence of pH and temperature on the lysis of yeast using experimental design. In this study, the enzymatic extract containing β-1,3-glucanase and chitinase, obtained from the micro-organism Moniliophthora perniciosa, was used. The experiment showed that the best conditions for lysis of Pseudozyma sp. (CCMB 306) and Pseudozyma sp. (CCMB 300) by lytic enzyme were pH 4.9 at 37 ºC and pH 3.9 at 26.7 ºC, respectively. The lytic enzyme may be used for obtaining various biotechnology products from yeast.

Enzimas pectinolíticas de origem microbiana são conhecidas por desempenhar um papel importante comercialmente em uma série de processos industriais. Dois tipos de levedura podem ser distinguidos para a produção dessas enzimas. Um grupo inclui aqueles que têm capacidade de produzi-las na ausência de um indutor e outro grupo compreende as leveduras que as produzem na presença de um indutor. O objetivo deste estudo foi investigar a influência de substâncias pécticas, de glicose, do pH e da temperatura na atividade da poligalacturonase de Kluyveromyces marxianus CCMB 322. O cultivo foi em caldo de fermentação contendo diferentes concentrações de glicose e substâncias pécticas. A atividade da poligalacturonase foi determinada pelo método do DNS, e pH e temperatura otimizados pelo delineamento experimental central composto de experimentos. A poligalacturonase secretada por K. marxianus CCMB 322 foi parcialmente constitutiva, apresentando pH e temperatura ótima de 7,36 e 70 °C, respectivamente e reteve 93% de sua atividade original após 50 minutos a 50 °C. A termoestabilidade da enzima poligalacturonase foi estudada em várias temperaturas (50, 60, 70 e 80 °C) em diferentes tempos de incubação (0, 10, 20, 30, 40 e 50 minutos). Este estudo mostrou que a glicose tem influência na regulação da síntese da poligalacturonase.

Microbial pectinolytic enzymes are known to play a commercially important role in a number of industrial processes. Two kinds of yeast can be discerned regarding the production of enzymes. One group includes those which can produce enzymes in the absence of an inducer, and the other group comprises the yeasts that produce enzymes in the presence of an inducer. The objective of this study was to investigate the influence of pectic substances, glucose, pH, and temperature on the polygalacturonase activity by Kluyveromyces marxianus CCMB 322. The yeast was grown in a fermentation broth containing different concentrations of glucose and pectic substances. The polygalacturonase activity was determined by the DNS method, and the pH and temperature were optimized using a central composite experimental design. The polygalacturonase secreted by K. marxianus CCMB 322 was partially constitutive showing optimum pH and temperature of 7.36 and 70 °C, respectively, and maintained approximately 93% of its original activity for 50 minutes at 50 °C. Thermal stability of the polygalacturonase enzyme was studied at different temperatures (50, 60, 70, and 80 °C) and different incubation times (0, 10, 20, 30, 40, and 50 minutes). This study showed that glucose can influence the regulation of the synthesis of polygalacturonase.

O estado fisiológico de um fruto está intimamente relacionado com a maturação dos frutos e das condições climáticas durante a fase de crescimento, quando o fruto apresenta mudanças que vão desde a cor, textura e sabor. O amadurecimento do fruto pode envolver uma série complexa de reações bioquímicas, com alteração nas atividades enzimáticas, fenóis, taninos, ácido ascórbico. Foram estudadas a atividade de enzimas (carboximetilcelulase, poligalacturonase, pectina liase), a concentração total de compostos fenólicos, o teor de taninos condensados e a concentração de vitamina C em cinco estádios de maturação do fruto jamelão. Alteração significativa foi observada entre os estádios de maturação. Os compostos fenólicos foram maiores no estádio verde (705.01 ± 7.41). A maior concentração de taninos foi encontrada no estádio Verde/Roxo (699.45 ± 0.22). Os resultados mostraram que o ácido ascórbico varia significativamente de 50.81 ± 1.43 para 6.61 ± 1.04 mg.100 g-1 de polpa durante a maturação. A atividade específica de pectina liase foi maior no estádio verde (1531.90 ± 5.83). A atividade específica da enzima poligalacturonase foi maior na fase madura (1.83 ± 0.0018). A atividade específica da carboximetilcelulase foi maior na fase madura (4.61 ± 0.0024). O baixo teor de ácido ascórbico presente nos frutos de jambolão mostram que esta não é uma boa fonte deste nutriente, no entanto, outras características podem tornar os produtos de jambolão interessantes para consumo.

The physiological state of a fruit is closely related to ripening and climatic conditions during the growing period when the fruit undergo changes in color, texture, and flavor. The ripening of the fruit can involve a complex series of biochemical reactions with alteration in enzymes activities, phenols, tannins, and ascorbic acid. The activity of enzymes (carboximethylcellulase, polygalacturonase, and pectinlyase), the total concentration of phenolic compounds, condensed tannins, and vitamin C in five stages of maturation were studied. Significant changes were observed between the maturity stages. The phenolic compounds were higher at green stage (705.01 ± 7.41); tannins were higher at green/purple stage (699.45 ± 0.22). The results showed that the ascorbic acid levels of the pulp varied significantly from 50.81 ± 1.43 to 6.61 ± 1.04 mg.100 g-1 during maturation. The specific activity of pectin lyase was higher at green stage (1531.90 ± 5.83). The specific activity of polygalacturonase was higher at mature stage (1.83 ± 0.0018). The specific activity of carboximetilcelulose was higher at ripe mature stage (4.61 ± 0.0024). The low ascorbic acid content found in jambolan fruit indicates that this fruit is not a rich source of this nutrient; however, other characteristics can make jambolan products fit for human consumption.